| Domaine | Résumé des principaux résultats | |
| Enzymologie | -
Première identification optique et chimique d'un
intermédiaire du cycle catalytique de la tryptophane synthase
(TSase) bactérienne - Propriétés structurales et fonctionnelles de la beta-galactosidase omega-complémentée |
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| Immunochimie | -
Mise au point et applications d'une méthode fondée sur
l'ELISA pour mesurer l'affinité et les constantes de vitesse
d'association et de dissociation d'un anticorps monoclonal et de son
antigène protéinique en solution. - Mise au point d'une méthode de marquage immunochimique pulsé pour l'étude du repliement des protéines, et son application au mécanisme de repliement du lysozyme de poule |
 Epitopes du lysozyme (jaune-rouge et vert-bleu) immuno-marqués |
| Mecanismes de repliement des protéines | -
Première démonstration de l'existence de régions
à repliement autonome (actuellement dénommées "domaines")
dans les protéines de grande taille - Première identification et caractérisation d'une séquence d'étapes intermédiaires dans le repliement de la sous-unité beta2 de la tryptophane synthase, apportant la preuve que le repliement n'obéit pas au modèle simple "à deux états" - Première identification et caractérisation d'un intermédiaire précoce du repliement, nommé "pre-molten globule", résultant de la condensation hydrophobe très rapide de la chaîne peptidique - Démonstration qu'une protéine dénaturée peut se replier via des chemins différents - Caractérisation par des méthodes de cinétique rapide de la structure secondaire d'intermédiaires précoces formés pendant les 4 premières millisecondes du repliement - Démonstration que la quantité de protéine native retrouvée après renaturation dépend d'une compétition cinétique (depuis rebaptisée "partition cinétique") entre repliement et agrégation |
 Cinétique de repliement du lysozyme observé en dichroïsme circulaire dans l'UV lointain |
| Mecanismes d'agrégation des protéines | - Démonstration que les agrégats formés pendant le repliement des protéines est causé par des interactions spécifiques pseudo-natives, pourtant illégitimes, entre des intermédiaires de repliement. Plutôt que de se faire entre régions complémentaires d'une même chaîne polypeptidique comme lors du repliement productif, ces interactions se font entre des régions complémentaires portées par des chaînes distinctes, conduisant ainsi à la formation de multimères insolubles |  Repliement ou agrégation ? |
| Biologie cellulaire | -
Mise au point d'un procédé d'isolement de chromosomes de
souris et son application à la purification des chromosomes X, Y
et 21 murins. Ce procédé est fondé sur
l'extraction des chromosomes de lignées de souris portant des
translocations robertsoniennes multiples, suivie de la
séparation des chromosomes recherchés par
cytométrie en flux - Mise au point d'une méthode de quantification "cellule par cellule" par cytométrie en flux de l'endocytose de molécules liées à des récepteurs membranaires |
 Avec P. Métézeau au cell-sorter |
| Développements techniques |
- Ultracentrifugation analytique: Mise au point d'une méthode de mesure de la masse moléculaire de chaînes polypeptidiques dénaturées en présence de chlohydrate de guanidine concentré - Imagerie par radioactivité: Développement en collaboration avec Georges Charpak, Prix Nobel de Physique, du Beta-imager, un scanner de radioactivité ultra-sensible à très bas bruit de fond pour la détection d'isotopes émettant des rayonnements beta de faible énergie (C14, H3, ...) adapté à la recherche biologique - Mesures de dichroïsme circulaire en cinétique rapide: Mise au point, en collaboration avec deux industriels français (Bio-Logic et Jobin-Yvon), d'un système de mélangeur rapide couplé à un spectrodichrographe. Parmi de nombreuses autres applications possibles, cet appareil nous a permis de suivre la cinétique de formation de la structure secondaire de diverses protéines dès les 4 premières millisecondes du processus de repliement - Spectroscopie infra-rouge: Mise au point d'un procédé d'enregistrement du spectre infra-rouge de protéines à l'aide d'un accessoire à ATR (Réflection Total Aténuée), qui simplifie et améliore considérablement l'acquisition du spectre infra-rouge des protéines - Cytométrie en flux: Première mise en service en France d'un trieur de cellules par cytométrie en flux; conception et mise au point d'un "concentrateur sous vide" qui permet l'hybridation in situ d'échantillons triés sur filtre |
 Au travail sur le Beta-imager  |
| Applications Industrielles |
- Production de protéines à usage thérapeuthique: Plusieurs
procédés industriels utilisés pour la
réactivation de protéines inactives insolubles produites
par des cellules recombinantes (génétiquement
modifiées) sont fondées sur des protocoles de
renaturation mis au point dans notre laboratoire - Mise au point d'un produit cosmétique anti-vieillissement: Invention de l'utilisation de liposomes pour combattre le vieillissemt; mise au point en collaboration avec "Parfums Christian Dior", de CAPTURE, la première crème anti-vieillissement aux liposomes pour le traitement de la peau. |
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